一种精氨酸脱亚胺酶的重组制备方法。本发明公开了一种大肠杆菌重组表达精氨酸脱亚胺酶(ArginineDeiminase ,以下简称ADI)的制备方法,主要包括重组表达方法、采用尿素作为变性剂的包涵体复性方法。其中重组表达制备而成的ADI其N末端不含甲硫氨酸。